sábado, 1 de junio de 2013

Técnica de Potasio.



 El método presentado para la determinación de potasio se basa en la técnica turbidimetrica publicada por Hillman y Beyer en 1967. Los resultados coincidían favorablemente con aquellos obtenidos por fotometría de flama y fueron adecuados para la detección rápida de híper e hipokalemia en ausencia de un fotómetro de flama o electrodo ion-selectivo. Los iones potasio en un medio alcalino libre de proteínas reaccionan con el tetrafenilborato de sodio para producir una suspensión turbia finamente dispersa de tetrafenilborato de potasio. La turbidez producida es proporcional a las concentraciones de potasio.

REACTIVOS
-Reactivo de borato de potasio.
Solución acuosa de tetrafenilborato de sodio, 0.2 moI/L
-Reactivo de hidróxido de Sodio.
Hidróxido de sodio acuoso, 2.0 moI/L
-Reactivo de TCA Precipitante.
Solución acuosa de ácido tricloroacético (TCA) 0.3 moI/L
-Estándar de Potasio (Equivalente a 4.0 mmoI/L).
Solución de cloruro de potasio en TCA acuoso (0.3 moI/L)

MATERIAL REQUERIDO
*Espectrofotómetro capaz de leer absorbancias a 580 nm
*Centrifuga
*Pipeta automática de 0.1, 0.2, 1.0, 2.0, y 9.0 mL.
*Vasos graduados, probetas o pipetas.
*Tubos de prueba o celdillas
*Agitador vortex
*Agitador

PROCEDIMIENTO
Preparación del sorbrenadante de libre de proteínas.
1. Añada 0.05 mL de suero, plasma u orina diluida a tubos
Previamente etiquetados.
2. Añada 0.5 mL de Reactivo TCA precipitante gota a gota a
Cada tubo mezclado vigorosamente (de preferencia utilizar
vortex).
3. Déjelo por 5minutos, después centrifugue a alta velocidad por
5 – 10 minutos.
Procedimiento de la prueba
1. Añada el estándar o el sobrenadante claro en la mitad de la
Superficie del reactivo de trabajo, asegúrese que cada
Celdilla sea mezclada con cuidado antes de proseguir con la
Siguiente muestra, de acuerdo al siguiente esquema:
Nota: Puede utilizar todos los volúmenes al doble si el
Instrumento que utiliza requiere volúmenes mayores a 1.0 mL.
1. Incube todas las celdillas a temperatura ambiente por 5
Minutos.
2. Lea S y U contra RB a 580 en un intervalo de 60 minutos.
Control de calidad: En cada corrimiento de muestras se debe
Incluir un control de suero y/u orina ensayados ya sea por este
Método, fotómetro de flama o electrodo ión selectivo.

RESULTADOS
Los valores se pueden derivar por la siguiente ecuación:
Potasio en suero, plasma u orina (mmoI/L)=Au x 4
As
Orina Potásica (mmol/L x Volumen de 24 h (mL)
                                   1000
Donde Au y As son los valores de absorbancia de la muestra y
Estándar, respectivamente, y 4 es la concentración del estándar.
VALORES ESPERADOS
 Rango Normal: Suero 3.6-5.5 mmol/L
Plasma 3.5-4.8 mmol/L
Orina 26-123 mmol/24h (varía con la dieta).

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