Técnica del sodio.

Anteriormente  al fotómetro de flama y los electrodos ion-selectivos, el método más popular para determinar sodio en los fluidos corporales involucran su precipitación como una sal triple de acetato de zinc uranilo sódica. El método presentado es esencialmente una adaptación del último esquema, en donde el sodio se precipita del sobrenadante libre de proteínas como triple sal. La disminución resultante de la absorbancia de la mezcla de reactivo de color-sobrenadante es proporcional al contenido de sodio de la muestra.

REACTIVOS

Reactivo de Color de Sodio.

Solución de acetona de uranilo, 5.3g/dL y acetato de zinc, 15.4g/dL, en solución acuosa acido acético-etanol.

Reactivo precipitante.

Solución acuosa de acido tricloroacetico (TGA), 10g/dL.

Estándar de sodio.

Cloruro de sodio de 140mmol/L, en solución TCA. Equivalente a un valor de sodio de 140mmol/L cuando se utiliza como se indica en este método.

MATERIALES REQUERIDOS:

*Espectrofotómetro capaz de leer absorbencias a 420 nm.

*Centrifuga con alta capacidad de velocidad (>1500 rpm)

*Pipetas exactas de 0.5 y 2.5 mL.

*Tubos de prueba y celdillas.

 *Agitador.

* Vortex.

*Cronómetro.

PROCEDIMIENTO

 Preparación del sobrenadante libre de proteínas.

1. Añada 0.5 ml de suero plasma u orina diluida a tubos adecuadamente marcados 

2. Añada 0.5 ml de reactivo precipitante gota a gota a cada tubo con agitación vigorosa

3. Dejelo reposar por 5 minutos después centrifugue

Procedimiento

1. Pipetee en los tubos marcados los siguientes volúmenes (mL), agitando rápidamente después de cada adición del reactivo de color

	Reactivo Blanco (RB)	Estándar (S)	Muestra (U)
Agua Destilada	0.5
Estándar		0.5
Sobrenadante			0.5
Reactivo color	2.5	2.5	2.5

2. Nuevamente mezcle el contenido de todos los tubos

3. Incube  los tubos por 10 minutos a temperatura ambiente (15 – 25°C)

4. Después de incubar, mezcle y centrifugue a alta velocidad por 5 min

5. Transfiera con cuidado el sobrenadante de cada tubo en la celdilla apropiada

6. Con el espectofotometro a 420nm. Lea y registre absorbancia del blanco reactivo, estándar y de la muestra en 30 min

RESULTADOS

Los valores se derivan del siguiente calculo:

Sodio en suero, plasma u orina (mmol/L)

  Abs(RB)- Abs (U)      X140

  Abs( RB)- Abs (8)

Donde Abs (RB)  Abs (U) y Abs (8) representan las absorbancias del blanco del reactivo , muestra y estándar respectivamente, y 140 es el valor equivalente del estándar del sodio en mmol/L

NOTA: Los valores de orina se deben multiplicar por el factor de

dilución apropiado.

Sodio en orina (mmoI/24 h) =

Sodio en orina (mmol/L) x volumen de 24 h (mL)

                                1000

VALORES ESPERADOS

Rango normal: Suero/plasma 135 – 155 mmoI/L

Orina 75 – 200 mmoI/24h